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Title: Determinar la eficiencia de transformación genética mediante el método químico y método físico (Electroporación) a través de la bacteria Escherichia coli
Authors: Moreno Terán, Jhoselyn Yolanda
Keywords: Electroporación
Shock térmico
Eficiencia
UFC
Issue Date: Jun-2018
Publisher: Pontificia Universidad Católica del Ecuador Sede Ibarra
Series/Report no.: T/636.082/M8154d/2018;074806
Abstract: Genetic engineering is the set of techniques that approve the manipulation of genetic material, which allows to eliminate unwanted characteristics and modify characteristics according to the need of research. This research aims to determine the efficiency of genetic transformation with two methods Electroporation and Thermal Shock. In addition to standardizing protocols of the different methods where greater transformation efficiency is obtained. For this, three treatments were established in which the T1 (Electroporation), T2 (Thermal Shock), T3 (Competent cells). To determine the transformation efficiency, several variables were taken into account, such as colonies per plate, colony forming units (CFU) and transformation efficiency (E.T.). Where it was made with the help of mathematical calculations and thus determining UFC and E.T. in this way, providing as a result that T1 (Electroporation) is the most efficient method of transformation, obtaining better results compared to T2 (Thermal Shock) and T3 (Competent cells), with respect to the number of colonies per plate (506), UFC (5060) and a Transformation Efficiency (1.265x 1011) U. In this way, checking that the proposed hypothesis T1 (Electroporation) is the most efficient method of transformation, obtaining better results in comparison with the other treatments.
Description: La ingeniería genética es el conjunto de técnicas que aprueba la manipulación del material genético, lo cual permite eliminar características no deseadas y modificar características de acuerdo a la necesidad de la investigación. Esta investigación tiene como objetivo determinar la eficiencia de transformación genética con dos métodos Electroporación y Shock Térmico. Además de estandarizar protocolos de los diferentes métodos en donde se obtenga mayor eficiencia de transformación. Para ello se estableció tres tratamientos en donde el T1 (Electroporación), T2 (Shock Térmico), T3 (Células competentes). Para determinar la eficiencia de transformación se tomó en cuenta diversas variables como son colonias por placa, unidades formadoras de colonias (UFC) y Eficiencia de transformación (E.T.). En donde se efectuó con ayuda de cálculos matemáticos y así determinando UFC y E.T. de esta manera proporcionando como resultado que el T1 (Electroporación) es el método más eficiente de transformación, obteniendo mejores resultados en comparación del T2 (Shock Térmico) y T3 (Células competente), con respecto al número de colonias por placa (506), UFC (5060) y una Eficiencia de Trasformación (1.265x 1011) U. De esta manera comprobando que la hipótesis planteada T1 (Electroporación) es el método más eficiente de transformación obteniendo mejores resultados en comparación a los otros tratamientos.
URI: https://dspace.pucesi.edu.ec/handle/11010/218
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